产品分类
MES-OV-cas9 Cell(人卵巢囊腺癌细胞）
- 产品描述
- 细胞复苏
- 细胞传代
- 细胞冻存
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- 商品名称: MES-OV-cas9 Cell(人卵巢囊腺癌细胞）
- 商品编号: LM01500-Cas9
- 物种: human
- 细胞形态: 贴壁细胞，上皮细胞样
- 规格: 冻存管1×10^6/管 或 T25活细胞/瓶
- 完全培养基成分: McCoy 5A+10%FBS
- 抗生素浓度: puromycin,0.5ug/ml
- 培养环境: 37℃，5%CO₂
- 传代比例: 1/2 到 1/4 传代
- 幻夜频次: 2~3次/周
- 支原体检测: 阴性
- 表达基因: Cas9蛋白，spcas9，CRISPR-cas9蛋白
- 细胞背景: MES-OV cells were isolated from the ascites fluid from a 53 year-old female patient with Stage III ovarian cystadenocarcinoma. Clonogenic assays performed at the time of isolation indicated that this cell line is quite sensitive to vinca alkaloids (vinblastine) (Deposit Form Information). Based on gene expression profiling, MES-OV manifests some mesenchymal features, with high expression of collagens (type VI, alpha 3, type I, alpha 2, type III, and alpha 1), lumican, matrix metalloproteinase 2, and SPARC. This cell line lacks many of the distinct molecular characteristics of epithelial cells, typically seen in ovarian neoplasms, although expression of MUC1 and mesothelin was notable (PubMed: 12960427). This metastatic cell line also highly expresses AXL receptor tyrosine kinase protein (PubMed: 20858715).
- 产品优势: 1.效率与便捷性： “即用型”平台，只需导入gRNA，操作简单，编辑效率高，节省时间和成本。 2.高通量筛选： 是进行全基因组CRISPR筛选的理想基础平台，用于系统性发现功能基因。 3.一致性与可重复性： 细胞群体遗传背景一致，Cas9表达稳定，实验结果更可靠，对照设置更严谨。 4.功能可扩展性： 可构建表达dCas9、高保真Cas9等变体的细胞系，实现基因敲除以外的多种功能（调控、成像等）。
- 应用: Cas9细胞系的核心优势在于它将基因编辑的核心工具“Cas9”内化为了细胞自身的稳定组成部分，从而将复杂的基因编辑实验转变为一种更高效、更稳定、更易于规模化的标准化流程，极大地推动了功能基因组学的研究。在基因敲除，CRISPR文库筛选，疾病模型，药物研发等多个前沿生物医学领域应用广泛。
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- 从液氮罐或者-80℃冰箱取出细胞冻存管，并迅速将冻存管置于37℃水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，可将冻存管置于干净的一次性PE手套内再置于水浴中。
- 待冻存管中液体融化后，立即取出，并用75%酒精纱布擦拭冻存管表面。
- 将冻存管置于生物安全柜中，并将冻存管中的液体转移到含有约9mL完全培养基的离心管中，300g，5min离心，弃上清。
- 用适量的完全培养基重悬细胞并转移到新的培养瓶中，并将细胞置于5% CO₂、37℃恒温培养箱静置培养。
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当细胞密度达到 80%以上时，可以进行传代，传代比例 1:2~1:4，2~3 天传代一次。具体操作如下：
- 吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入适量PBS，轻轻晃动润洗细胞，然后将PBS 吸出。
- 该细胞不建议使用胰酶消化，可以直接吹打使之悬浮或者使用细胞刮。
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细胞汇合度达到80%-90%时可进行细胞冻存操作。自制冻存液成分：DMEM完全培养基+30%FBS+10%DMSO，为保证冻存细胞较高活力，冻存液最好提前配制并置于4℃冰箱预冷。
细胞冻存具体操作如下：
- 参考细胞传代过程，300g，5min离心，弃上清。
- 根据细胞沉淀量加入适量提前配制好并预冷的细胞冻存液（推荐1个T75培养瓶的细胞可加入3ml冻存液），轻轻吹打使细胞分散。
- 将细胞悬液转移至细胞冻存管中，1ml/管。冻存管需提前写好标签或者贴好标签。标签信息包含细胞名称，代次，冻存时间及操作人员姓名等。
- 将细胞冻存管置于细胞程序降温盒中，并将盒子置于-80℃冰箱中过夜。过夜后可将冻存管转移至液氮罐中长期保存。
产品类型： Cas9细胞系
细胞系信息
物种
human
细胞形态
贴壁细胞，上皮细胞样
规格
冻存管1×10^6/管 或 T25活细胞/瓶
完全培养基成分
McCoy 5A+10%FBS
支原体检测
阴性
抗生素浓度
puromycin,0.5ug/ml
培养环境
37℃，5%CO₂
传代比例
1/2 到 1/4 传代
传代频次
2~3次/周
表达基因
Cas9蛋白，spcas9，CRISPR-cas9蛋白
细胞系说明
细胞背景
MES-OV cells were isolated from the ascites fluid from a 53 year-old female patient with Stage III ovarian cystadenocarcinoma. Clonogenic assays performed at the time of isolation indicated that this cell line is quite sensitive to vinca alkaloids (vinblastine) (Deposit Form Information). Based on gene expression profiling, MES-OV manifests some mesenchymal features, with high expression of collagens (type VI, alpha 3, type I, alpha 2, type III, and alpha 1), lumican, matrix metalloproteinase 2, and SPARC. This cell line lacks many of the distinct molecular characteristics of epithelial cells, typically seen in ovarian neoplasms, although expression of MUC1 and mesothelin was notable (PubMed: 12960427). This metastatic cell line also highly expresses AXL receptor tyrosine kinase protein (PubMed: 20858715).
产品优势
1.效率与便捷性： “即用型”平台，只需导入gRNA，操作简单，编辑效率高，节省时间和成本。 2.高通量筛选： 是进行全基因组CRISPR筛选的理想基础平台，用于系统性发现功能基因。 3.一致性与可重复性： 细胞群体遗传背景一致，Cas9表达稳定，实验结果更可靠，对照设置更严谨。 4.功能可扩展性： 可构建表达dCas9、高保真Cas9等变体的细胞系，实现基因敲除以外的多种功能（调控、成像等）。
应用
Cas9细胞系的核心优势在于它将基因编辑的核心工具“Cas9”内化为了细胞自身的稳定组成部分，从而将复杂的基因编辑实验转变为一种更高效、更稳定、更易于规模化的标准化流程，极大地推动了功能基因组学的研究。在基因敲除，CRISPR文库筛选，疾病模型，药物研发等多个前沿生物医学领域应用广泛。
细胞培养说明
细胞复苏
- 从液氮罐或者-80℃冰箱取出细胞冻存管，并迅速将冻存管置于37℃水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，可将冻存管置于干净的一次性PE手套内再置于水浴中。
- 待冻存管中液体融化后，立即取出，并用75%酒精纱布擦拭冻存管表面。
- 将冻存管置于生物安全柜中，并将冻存管中的液体转移到含有约9mL完全培养基的离心管中，300g，5min离心，弃上清。
- 用适量的完全培养基重悬细胞并转移到新的培养瓶中，并将细胞置于5% CO₂、37℃恒温培养箱静置培养。
细胞传代
当细胞密度达到 80%以上时，可以进行传代，传代比例 1:2~1:4，2~3 天传代一次。具体操作如下：
- 吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入适量PBS，轻轻晃动润洗细胞，然后将PBS 吸出。
- 该细胞不建议使用胰酶消化，可以直接吹打使之悬浮或者使用细胞刮。
细胞冻存
细胞汇合度达到80%-90%时可进行细胞冻存操作。自制冻存液成分：DMEM完全培养基+30%FBS+10%DMSO，为保证冻存细胞较高活力，冻存液最好提前配制并置于4℃冰箱预冷。
细胞冻存具体操作如下：
- 参考细胞传代过程，300g，5min离心，弃上清。
- 根据细胞沉淀量加入适量提前配制好并预冷的细胞冻存液（推荐1个T75培养瓶的细胞可加入3ml冻存液），轻轻吹打使细胞分散。
- 将细胞悬液转移至细胞冻存管中，1ml/管。冻存管需提前写好标签或者贴好标签。标签信息包含细胞名称，代次，冻存时间及操作人员姓名等。
- 将细胞冻存管置于细胞程序降温盒中，并将盒子置于-80℃冰箱中过夜。过夜后可将冻存管转移至液氮罐中长期保存。