ITGAV Knockout Raji Cell Pool

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LM01900138448

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  • 产品描述
  • 细胞复苏
  • 细胞传代
  • 细胞冻存
  • 抗体验证结果
    • 品牌: ELEM粒曼
    • 商品名称: ITGAV Knockout Raji Cell Pool
    • 商品编号: LM01900138448
    • Gene Symbol: ITGAV
    • Ensembl ID: ENSG00000138448
    • Uniprot ID: P06756
    • 宿主细胞 / 类型: Raji/人Burkitt's淋巴瘤细胞
    • NCBI Gene ID: 3685
    • 规格: 1×10^6 cells/ 冻存管
    • 筛选标记: N/A
    • 生长特性: 悬浮细胞
    • 培养条件: 37℃,5% CO2 的培养箱,1/2 到 1/4 传代
    • 倍增时间: ~24-36 hours
    • 生长培养基: RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
    • 参考换液频率: 2-3天换液
    • 支原体检测结果: 阴性
    • 敲除效率(Sanger测序): >70%
    • 蛋白质组验证结果: N/A
    • 抗体货号: 添加中
    • 目标基因介绍: (Microbial infection) In case of HIV-1 infection, the interaction with extracellular viral Tat protein seems to enhance angiogenesis in Kaposi's sarcoma lesions.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB3 acts as a receptor for Herpes virus 8/HHV-8.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB3 acts as a receptor for Human parechovirus 1.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB3 acts as a receptor for West nile virus.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB5 acts as a receptor for Adenovirus type C.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB5 and ITGAV:ITGB3 act as receptors for Coxsackievirus A9 and B1.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB6 acts as a receptor for herpes simplex 1/HHV-1.||The alpha-V (ITGAV) integrins are receptors for vitronectin, cytotactin, fibronectin, fibrinogen, laminin, matrix metalloproteinase-2, osteopontin, osteomodulin, prothrombin, thrombospondin and vWF. They recognize the sequence R-G-D in a wide array of ligands. ITGAV:ITGB3 binds to fractalkine (CX3CL1) and may act as its coreceptor in CX3CR1-dependent fractalkine signaling (PubMed:23125415). ITGAV:ITGB3 binds to NRG1 (via EGF domain) and this binding is essential for NRG1-ERBB signaling (PubMed:20682778). ITGAV:ITGB3 binds to FGF1 and this binding is essential for FGF1 signaling (PubMed:18441324). ITGAV:ITGB3 binds to FGF2 and this binding is essential for FGF2 signaling (PubMed:28302677). ITGAV:ITGB3 binds to IGF1 and this binding is essential for IGF1 signaling (PubMed:19578119). ITGAV:ITGB3 binds to IGF2 and this binding is essential for IGF2 signaling (PubMed:28873464). ITGAV:ITGB3 binds to IL1B and this binding is essential for IL1B signaling (PubMed:29030430). ITGAV:ITGB3 binds to PLA2G2A via a site (site 2) which is distinct from the classical ligand-binding site (site 1) and this induces integrin conformational changes and enhanced ligand binding to site 1 (PubMed:18635536, PubMed:25398877). ITGAV:ITGB3 and ITGAV:ITGB6 act as a receptor for fibrillin-1 (FBN1) and mediate R-G-D-dependent cell adhesion to FBN1 (PubMed:12807887, PubMed:17158881). Integrin alpha-V/beta-6 or alpha-V/beta-8 (ITGAV:ITGB6 or ITGAV:ITGB8) mediates R-G-D-dependent release of transforming growth factor beta-1 (TGF-beta-1) from regulatory Latency-associated peptide (LAP), thereby playing a key role in TGF-beta-1 activation (PubMed:15184403, PubMed:22278742, PubMed:28117447). ITGAV:ITGB3 act as a receptor for CD40LG (PubMed:31331973).
    • 细胞开发路径: 采用CRISPR-RNP方法生成稳定KO Cell Pool;Sanger 测序结果显示KO Cell Pool敲除效率>70%。
    • 应用: 高敲除效率的基因敲除细胞池(KO Cell Pool),特别适用于初步功能分析、复杂疾病模型的开发、精准药物筛选以及广泛的基因发现研究。KO pool能够无需繁琐的单克隆挑选过程,直接应用于多种类型的测定和分析,大幅提升实验效率。
  • 01.  在 37℃水浴中预热完全培养基。
    02.  将冻存管在 37℃水浴中解冻 1-2 分钟。
    03.  将冻存管转移到生物安全柜中,并用 70% 乙醇擦拭表面。
    04.  拧开冻存管管盖,将细胞悬液轻轻转移到含有 9mL 完全培养基的无菌离心管中。
    05.  在室温下以 125g 离心 5-7 分钟,弃上清。
    06.  用 5mL 的完整培养基重悬细胞沉淀,将细胞悬液转移到 T25 培养瓶中。
    07.  将细胞转移到 37℃,5% CO2 的培养箱中培养。
    08.  参考传代比例:1/2 到 1/4 传代,2-3 天长满。

  • 01.  取少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测,当细胞密度达到1.5x10^6 cells/mL时,可进行细胞传代。
    02.  将培养基从 4℃冰箱中拿出, 置于 37℃水浴中温度接近 37℃时取出并在瓶子表面喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。

    03.  从培养箱中取出待传代的培养瓶,瓶身喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
    04.  取足量细胞加入盛有新鲜培养基的培养瓶中,按需求调整接种比例,并补充培养瓶中完全培养基,T75 加至 13-15mL,T25 加至 5mL。将细胞密度维持在7x10^5 cells/mL。
    05.  盖上瓶盖拧紧后轻轻晃动瓶身,使细胞混合均匀后置于 37℃,5% CO2 培养箱中。

  • 01.  准备冻存液,并提前预冷。
    02.  确保待冻存的细胞满足冻存要求,用显微镜检查以下状态:健康的外观及形态特征、所处生 长周期(对数晚期)、无污染或衰退迹象。
    03.  将细胞收集到无菌的锥形离心管中并计数细胞。
    04.  在室温下以250×g离心细胞5分钟,并小心吸出培养基。
    05.  将细胞以至少2x106细胞/mL的密度重悬于冻存液中。
    06.  吹打均匀后按照每管 1mL 的量分装至冻存管。
    07. 将细胞放在程序降温盒中,在 -80℃冰箱中冷冻。
    08. 后续将细胞转移到液氮罐中,以便长期储存。

  • 抗体验证中

产品类型: 基因敲除细胞池

细胞系信息

Gene Symbol

ITGAV

NCBI Gene ID

3685

Ensembl ID

ENSG00000138448

Uniprot ID

P06756

筛选标记

N/A

宿主细胞 / 类型

Raji/人Burkitt's淋巴瘤细胞

规格

1×10^6 cells/ 冻存管

生长培养基

RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

生长特性

悬浮细胞

培养条件

37℃,5% CO2 的培养箱,1/2 到 1/4 传代

倍增时间

~24-36 hours

参考换液频率

2-3天换液

支原体检测结果

阴性

敲除验证

敲除效率(Sanger测序)

>70%

蛋白质组验证结果

N/A

抗体货号

添加中

抗体验证结果

抗体验证中

细胞系说明

目标基因介绍

(Microbial infection) In case of HIV-1 infection, the interaction with extracellular viral Tat protein seems to enhance angiogenesis in Kaposi's sarcoma lesions.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB3 acts as a receptor for Herpes virus 8/HHV-8.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB3 acts as a receptor for Human parechovirus 1.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB3 acts as a receptor for West nile virus.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB5 acts as a receptor for Adenovirus type C.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB5 and ITGAV:ITGB3 act as receptors for Coxsackievirus A9 and B1.||(Microbial infection) Integrin ITGAV:ITGB6 acts as a receptor for herpes simplex 1/HHV-1.||The alpha-V (ITGAV) integrins are receptors for vitronectin, cytotactin, fibronectin, fibrinogen, laminin, matrix metalloproteinase-2, osteopontin, osteomodulin, prothrombin, thrombospondin and vWF. They recognize the sequence R-G-D in a wide array of ligands. ITGAV:ITGB3 binds to fractalkine (CX3CL1) and may act as its coreceptor in CX3CR1-dependent fractalkine signaling (PubMed:23125415). ITGAV:ITGB3 binds to NRG1 (via EGF domain) and this binding is essential for NRG1-ERBB signaling (PubMed:20682778). ITGAV:ITGB3 binds to FGF1 and this binding is essential for FGF1 signaling (PubMed:18441324). ITGAV:ITGB3 binds to FGF2 and this binding is essential for FGF2 signaling (PubMed:28302677). ITGAV:ITGB3 binds to IGF1 and this binding is essential for IGF1 signaling (PubMed:19578119). ITGAV:ITGB3 binds to IGF2 and this binding is essential for IGF2 signaling (PubMed:28873464). ITGAV:ITGB3 binds to IL1B and this binding is essential for IL1B signaling (PubMed:29030430). ITGAV:ITGB3 binds to PLA2G2A via a site (site 2) which is distinct from the classical ligand-binding site (site 1) and this induces integrin conformational changes and enhanced ligand binding to site 1 (PubMed:18635536, PubMed:25398877). ITGAV:ITGB3 and ITGAV:ITGB6 act as a receptor for fibrillin-1 (FBN1) and mediate R-G-D-dependent cell adhesion to FBN1 (PubMed:12807887, PubMed:17158881). Integrin alpha-V/beta-6 or alpha-V/beta-8 (ITGAV:ITGB6 or ITGAV:ITGB8) mediates R-G-D-dependent release of transforming growth factor beta-1 (TGF-beta-1) from regulatory Latency-associated peptide (LAP), thereby playing a key role in TGF-beta-1 activation (PubMed:15184403, PubMed:22278742, PubMed:28117447). ITGAV:ITGB3 act as a receptor for CD40LG (PubMed:31331973).

细胞开发路径

采用CRISPR-RNP方法生成稳定KO Cell Pool;Sanger 测序结果显示KO Cell Pool敲除效率>70%。

应用

高敲除效率的基因敲除细胞池(KO Cell Pool),特别适用于初步功能分析、复杂疾病模型的开发、精准药物筛选以及广泛的基因发现研究。KO pool能够无需繁琐的单克隆挑选过程,直接应用于多种类型的测定和分析,大幅提升实验效率。

细胞培养说明

细胞复苏

01.  在 37℃水浴中预热完全培养基。
02.  将冻存管在 37℃水浴中解冻 1-2 分钟。
03.  将冻存管转移到生物安全柜中,并用 70% 乙醇擦拭表面。
04.  拧开冻存管管盖,将细胞悬液轻轻转移到含有 9mL 完全培养基的无菌离心管中。
05.  在室温下以 125g 离心 5-7 分钟,弃上清。
06.  用 5mL 的完整培养基重悬细胞沉淀,将细胞悬液转移到 T25 培养瓶中。
07.  将细胞转移到 37℃,5% CO2 的培养箱中培养。
08.  参考传代比例:1/2 到 1/4 传代,2-3 天长满。

细胞传代

01.  取少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测,当细胞密度达到1.5x10^6 cells/mL时,可进行细胞传代。
02.  将培养基从 4℃冰箱中拿出, 置于 37℃水浴中温度接近 37℃时取出并在瓶子表面喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。

03.  从培养箱中取出待传代的培养瓶,瓶身喷洒 75% 酒精后置于生物安全柜中。
04.  取足量细胞加入盛有新鲜培养基的培养瓶中,按需求调整接种比例,并补充培养瓶中完全培养基,T75 加至 13-15mL,T25 加至 5mL。将细胞密度维持在7x10^5 cells/mL。
05.  盖上瓶盖拧紧后轻轻晃动瓶身,使细胞混合均匀后置于 37℃,5% CO2 培养箱中。

细胞冻存

01.  准备冻存液,并提前预冷。
02.  确保待冻存的细胞满足冻存要求,用显微镜检查以下状态:健康的外观及形态特征、所处生 长周期(对数晚期)、无污染或衰退迹象。
03.  将细胞收集到无菌的锥形离心管中并计数细胞。
04.  在室温下以250×g离心细胞5分钟,并小心吸出培养基。
05.  将细胞以至少2x106细胞/mL的密度重悬于冻存液中。
06.  吹打均匀后按照每管 1mL 的量分装至冻存管。
07. 将细胞放在程序降温盒中,在 -80℃冰箱中冷冻。
08. 后续将细胞转移到液氮罐中,以便长期储存。