多位点整合Shotgun稳转细胞系构建

粒曼生物的 Shotgun 稳转细胞系构建系统是基于可移动转座子原件在载体DNA和基因组中高效的“切割 - 粘贴”特性开发而来。在转座子整合过程中,目标基因被克隆在粒曼 Shotgun 转座子整合质粒中,目的基因两端的转座子识别原件(ITRS)可以被粒曼shotgun 转座酶识别、切割并且“粘贴”在基因组DNA特异性位点(TTAA)。

粒曼生物利用高效的 Shotgun 转座子系统开发出一系列 Shotgun 载体可以用于将目的 DNA 原件(荧光蛋白,报告基因,目标基因,Cas9,抗体,及shRNA)整合入真核细胞基因组快速构建稳定细胞系,达到过表达或诱导调控表达目标原件的目的。

与慢病毒系统相比 , 粒曼生物 Shotgun 系统具有如下优势:

1. 更加安全,更快的开发周期 - 无需病毒包装,纯化,病毒转染;

2. 目标 DNA 原件大小没有限制 - 可以整合 10-100Kb 大小的目标 DNA 到基因组中;

3. 可以完成多个目标原件的同时整合插入;

4. 诱导型表达 - 降低细胞复制时的负荷,只有在实验时诱导目标 DNA 原件(基因或 shRNA);

5. 粒曼预制了多个报告基因,抗体表达,shRNA 表达载体;

6. 高效的转座酶移除系统 - 瞬转粒曼Shotgun 移除酶可以高效将插入原件从基因组中移除,恢复野生型细胞。

 

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