产品分类
ipsc细胞Irrk2基因G2019S（ Gly>Ser，GGC>AGC）原位点突变细胞系
- 产品描述
- 参数
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- 自定义tab2
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- 品牌: HUAWEI P50 Pro
- 商品名称: 【搭载HarmonyOS 2】HUAWEI P50 Pro 4G全网通 原色双影像单元 麒麟9000芯片 万象双环设计 8GB+256GB曜金黑手机
- 商品编号: 234567895678
- 上市月份: 官网信息为主
- 商品毛重: 350.00g
- 商品产地: 中国大陆
- 系统: HarmonyOS 2
- 支持IPv6: 支持IPv6
京东价：京东价为商品的销售价，是您最终决定是否购买商品的依据。
京东价：京东价为商品的销售价，是您最终决定是否购买商品的依据。 划线价：商品展示的划横线价格为参考价，并非原价，该价格可能是品牌专柜标价、商品吊牌价或由品牌供应商提供的正品零售价（如厂商指导价、建议零售价等）或其他真实有依据的价格；由于地区、时间的差异性和市场行情波动，品牌专柜标价、商品吊牌价等可能会与您购物时展示的不一致，该价格仅供您参考。折扣：如无特殊说明，折扣指销售商在原价、或划线价（如品牌专柜标价、商品吊牌价、厂商指导价、厂商建议零售价）等某一价格基础上计算出的优惠比例或优惠金额；如有疑问，您可在购买前联系销售商进行咨询。 异常问题：商品促销信息以商品详情页“促销”栏中的信息为准；商品的具体售价以订单结算页价格为准；如您发现活动商品售价或促销信息有异常，建议购买前先联系销售商咨询关键词:- 关键词1
- 关键词2
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主体
- 上市月份 以官网信息为准
- 上市年份 2021年
- 首销日期 以官网信息为准
- 入网型号 JAD-AL50
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基本信息
- 机身宽度（mm） 72.8
- 机身厚度（mm） 8.5
- 机身材质分类 玻璃后盖；金属边框
- 机身长度（mm） 158.8
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数据接口
- 数据传输接口 WiFi热点；WIFI；NFC；蓝牙；WiFi Direct；OTG接口；红外
- NFC/NFC模式 支持卡模拟；支持（卡模式）；支持（读卡器模式）；支持（点对点模式）
- 充电接口类型 Type-C
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- 本商品质保周期为1年质保，在此时间范围内可提交维修申请，具体请以厂家准。 如因质量问题或故障，凭厂商维修中心或特约维修点的质量检测证明，享受7日内退货1日内换货，15日以上在质保期内享受免费保修等三包服务！(注:如厂家在商品介绍中有售后保障的说明
- 本商品质保周期为1年质保，在此时间范围内可提交维修申请，具体请以厂家准。 如因质量问题或故障，凭厂商维修中心或特约维修点的质量检测证明，享受7日内退货1日内换货，15日以上在质保期内享受免费保修等三包服务！(注:如厂家在商品介绍中有售后保障的说明,则此商品按照厂家说明执行售后保障服务。) 您可以查询本品牌在各地售后服务中心的联系方式，请点击这儿查询...... 品牌官方http://www.huawei.com/cn/售后服务电话：950800
产品类型： 点突变细胞系
产品详情介绍
细胞系信息
● 细胞名称：iPSC(induced pluripotent stem cell，诱导多能干细胞）
● 突变基因：lrrk2
● 突变位点：G2019S (Gly>Ser，GGC>AGC)
● 物种：人
● 细胞形态：贴壁, 上皮细胞样
● 完全培养基成分：专用培养基
● 传代比例：1：2~1：4
● 传代频次：2~3 次/周
● 支原体检测：阴性
基因编辑信息
● 构建方法：构建细胞点突变模型的理论基础是基因的同源重组修复。当基因组DNA双链由于外部因素而断裂时，细胞中存在的DNA修复机制就会被激发，对断裂位点的DNA双链进行修复，根据修复方式的不同可分为同源重组修复（HR）和非同源重组修复（NHEJ）。同源重组是指DNA在修复的过程中以同源的DNA序列作为模板进行完美修复，而非同源重组修复是指细胞内的相关蛋白直接将断裂的DNA两端重新连起来，可能会随机引入或缺失一定数量的碱基。根据这个理论基础，点突变细胞系的构建分为三个步骤：
- 定点切割DNA：在这个过程中，将Cas9蛋白与sgRNA一起转染到目的细胞中，在sgRNA的引导下，Cas9蛋白对靶位点处的DNA进行切割，产生DNA双链断裂。
- 同源重组修复DNA：基因组DNA双链断裂后，为了使DNA在修复过程中能通过同源重组的方式修复DNA并引入突变位点，需要为细胞提供额外的同源修复模板。这种同源模板序列是随sgRNA和Cas9蛋白一起转染进细胞的。
- 阳性细胞筛选：对于上述方法构建的点突变细胞，没有引入任何额外的报告或抗性基因，可以最大限度保持对基因组非编辑位点的影响。通过从编辑过的细胞池分离单克隆细胞进行大量测序，以得到预期的点突变单克隆细胞。
● 应用场景：粒曼生物点突变细胞系，精准模拟单碱基变异，适用于基因功能解析、疾病机制研究。可构建肿瘤、遗传病等病理细胞模型，用于药物靶点验证、耐药性评估，为基础科研与新药研发提供标准化、高可靠的体外实验体系。
● 验证数据：
细胞培养说明
● 细胞复苏
1）用Matrigel包被细胞培养皿/细胞培养板30min-60min。一般建议是复苏到T25瓶子里。
2）取出冻存的细胞，立即放入 37°C水浴槽中快速解冻。待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即移入含 5 mL细胞培养基的离心管中，离心收集细胞 (参考离心条件：1000 rpm，5 min) 。
3）小心移去上清液。加入1ml的新鲜细胞培养基mTESR，轻轻混匀，将细胞混合液移至预包被培养容器中。在接种细胞当天必须加入10uM的Y27632促进细胞贴壁。
4） 第二天需要将培养基换成无Y27632的培养基，此后每天换液都是用正常培养基换液。
● 细胞传代
贴壁细胞长到70%-80%满就可以传代，避免细胞太过拥挤影响细胞状态，传代比例1/10（具体传代比例实验人员可按照希望细胞生长的速度调整）。
1）细胞传代前需要预先用Matrigel包被细胞培养容器。
2）用消化液Accutase润洗一遍细胞，再加消化液Accutase 37℃培养箱消化5min，直到细胞呈流沙状留下，即可加入15ml离心管中，该15ml离心管中加入7-10ml的普通不含血清的培养基起到中和消化液的作用。
3）放入离心机中1000rpm/300g离心5min。
4）去掉上清液，用培养基1ml重悬细胞。接种到预包被的孔板即可。
● 细胞冻存
参考上述细胞传代过程，将细胞进行消化离心，如后续细胞要继续传代则需提前准备好预包被孔板，如直接冻存则不需要预包被孔板。
1）细胞离心之后去掉上清液，用快速细胞冻存液（无血清）重悬细胞。转移至冻存管中。
2）一瓶T25细胞，汇合度70%左右，可以用2ml冻存液，每1ml冻存一支。
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