CEM/C1细胞TP53(C238S)点突变细胞系

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LMPM011177

产品编号: LMPM011177

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产品规格:  冻存管1×10^6/管或T25活细胞/瓶

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    • 品牌: HUAWEI P50 Pro
    • 商品名称: 【搭载HarmonyOS 2】HUAWEI P50 Pro 4G全网通 原色双影像单元 麒麟9000芯片 万象双环设计 8GB+256GB曜金黑手机
    • 商品编号: 234567895678
    • 上市月份: 官网信息为主
    • 商品毛重: 350.00g
    • 商品产地: 中国大陆
    • 系统: HarmonyOS 2
    • 支持IPv6: 支持IPv6

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    关键词:
    • 关键词1
    • 关键词2
    • 主体

      • 上市月份 以官网信息为准
      • 上市年份 2021年
      • 首销日期 以官网信息为准
      • 入网型号 JAD-AL50
    • 基本信息

      • 机身宽度(mm) 72.8
      • 机身厚度(mm) 8.5
      • 机身材质分类 玻璃后盖;金属边框
      • 机身长度(mm) 158.8
    • 数据接口

      • 数据传输接口 WiFi热点;WIFI;NFC;蓝牙;WiFi Direct;OTG接口;红外
      • NFC/NFC模式 支持卡模拟;支持(卡模式);支持(读卡器模式);支持(点对点模式)
      • 充电接口类型 Type-C
  • 本商品质保周期为1年质保,在此时间范围内可提交维修申请,具体请以厂家准。 如因质量问题或故障,凭厂商维修中心或特约维修点的质量检测证明,享受7日内退货1日内换货,15日以上在质保期内享受免费保修等三包服务!(注:如厂家在商品介绍中有售后保障的说明
  • 本商品质保周期为1年质保,在此时间范围内可提交维修申请,具体请以厂家准。 如因质量问题或故障,凭厂商维修中心或特约维修点的质量检测证明,享受7日内退货1日内换货,15日以上在质保期内享受免费保修等三包服务!(注:如厂家在商品介绍中有售后保障的说明,则此商品按照厂家说明执行售后保障服务。) 您可以查询本品牌在各地售后服务中心的联系方式,请点击这儿查询...... 品牌官方http://www.huawei.com/cn/售后服务电话:950800

产品类型: 点突变细胞系

产品详情介绍

细胞系信息
● 细胞名称:CEM/C1(人急性淋巴细胞白血病细胞)
● 突变基因:TP53(C238S)
● 基因型:纯合子
● 物种:人
● 细胞形态:悬浮细胞
● 完全培养基成分:1640+10% FBS+1% P/S
● 传代比例:1:4-1:6
● 传代频次:2~3 天传代一次
● 支原体检测:阴性

 

基因编辑信息
● 构建方法:构建细胞点突变模型的理论基础是基因的同源重组修复。当基因组DNA双链由于外部因素而断裂时,细胞中存在的DNA修复机制就会被激发,对断裂位点的DNA双链进行修复,根据修复方式的不同可分为同源重组修复(HR)和非同源重组修复(NHEJ)。同源重组是指DNA在修复的过程中以同源的DNA序列作为模板进行完美修复,而非同源重组修复是指细胞内的相关蛋白直接将断裂的DNA两端重新连起来,可能会随机引入或缺失一定数量的碱基。根据这个理论基础,点突变细胞系的构建分为三个步骤:

  1. 定点切割DNA:在这个过程中,将Cas9蛋白与sgRNA一起转染到目的细胞中,在sgRNA的引导下,Cas9蛋白对靶位点处的DNA进行切割,产生DNA双链断裂。
  2. 同源重组修复DNA:基因组DNA双链断裂后,为了使DNA在修复过程中能通过同源重组的方式修复DNA并引入突变位点,需要为细胞提供额外的同源修复模板。这种同源模板序列是随sgRNA和Cas9蛋白一起转染进细胞的。
  3. 阳性细胞筛选:对于上述方法构建的点突变细胞,没有引入任何额外的报告或抗性基因,可以最大限度保持对基因组非编辑位点的影响。通过从编辑过的细胞池分离单克隆细胞进行大量测序,以得到预期的点突变单克隆细胞。


● 应用场景:粒曼生物点突变细胞系,精准模拟单碱基变异,适用于基因功能解析、疾病机制研究。可构建肿瘤、遗传病等病理细胞模型,用于药物靶点验证、耐药性评估,为基础科研与新药研发提供标准化、高可靠的体外实验体系。


● 验证数据:

 

 

细胞培养说明

● 细胞复苏

1)从液氮罐或者-80℃冰箱取出细胞冻存管,并迅速将冻存管置于37℃水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,可将冻存管置于干净的一次性PE手套内再置于水浴中。

2)待冻存管中液体融化后,立即取出,并用75%酒精纱布擦拭冻存管表面。

3)将冻存管置于生物安全柜中,并将冻存管中的液体转移到含有约9mL完全培养基的离心管中,300g,5min离心,弃上清。弃上清。

4) 用适量的完全培养基重悬细胞并转移到新的培养瓶中,并将细胞置于5% CO2、37℃恒温培养箱静置培养。

 

● 细胞传代

悬浮细胞的传代可通过补加或置换新鲜培养基的方式来完成,具体操作如下:

1)取出少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测,当细胞密度达到1.5×10⁶ cells/mL时,进行细胞传代培养。 

2)取足量细胞加入到盛有新鲜培养基的培养瓶中,将细胞密度维持在7×10^5cells/mL。 

3)将培养瓶竖直放置于5% CO2、37℃恒温培养箱中培养,如果细胞达到传代培养的密度,则进行传代培养。

4)培养基换液:每隔2-3天。(注意:培养瓶应使用带滤膜瓶盖,以保持培养基中的空气和CO2。) 

 

● 细胞冻存

离心收集细胞后,加入适量冻存液(每管细胞冻存量达到10⁶),将冻存管放入冻存盒置于-80℃冰箱,24h后将冻存管转入液氮长期保存。

 

 

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产品说明书 | 粒曼Easy point mutation点突变细胞构建定制服务及产品

服务指南 | 粒曼点突变细胞系构建服务Q&A【2411版】

服务指南 | 点突变稳定细胞系构建服务 Q&A 全解:从概念到实验细节,一篇看懂!【2512版】