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KYSE30&Eca-109细胞RBM39 CRISPRi多克隆稳定细胞系
- 产品描述
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- 品牌: ELEM粒曼
- 商品名称: KYSE30&Eca-109细胞RBM39 CRISPRi多克隆稳定细胞系
- 商品编号: LMKD011109
- 产品规格: 冻存管1×10^6/管 或 T25活细胞/瓶
- 销售价格: 咨询
细胞系信息
● 细胞名称：KYSE30(人食管鳞癌细胞）/ Eca-109(人食管癌细胞）
● 基因名称：RBM39
● 细胞类型：多克隆
● 物种：人
● 细胞形态：贴壁生长，上皮细胞样
● 完全培养基成分：DMEM+10%FBS+1%双抗 / RPMI-1640 +10% FBS+1% P/S
● 传代比例：1:2-1:4
● 传代频次：2~3 天传代一次
● 支原体检测：阴性基因编辑信息
● 构建方法
基因敲低（Gene Knockdown）是指通过某种方法降低或抑制特定基因的表达，而不是完全破坏该基因的DNA结构。与基因敲除（knockout）不同，基因敲低并不涉及永久性的基因改变，而是通过调控转录或翻译过程来减少目标蛋白的表达。基因敲低是基因功能研究中的一种常用技术，常用于研究基因在生物体或细胞中的作用。
本司采用CRISPRi的系统，利用了dCas9蛋白的特性，在不切割DNA的情况下，阻止RNA聚合酶结合到特定基因的启动子或编码区域，从而实现基因转录的抑制。● 应用场景
CRISPRi为研究者提供了强大的工具，用于精准、可控地调节基因表达，为功能基因组学、疾病模型、药物筛选等领域的研究提供了新的解决方案。
● 验证数据
Western blot检测结果
细胞培养说明
● 细胞复苏
1）从液氮罐或者-80℃冰箱取出细胞冻存管，并迅速将冻存管置于37℃水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，可将冻存管置于干净的一次性PE手套内再置于水浴中。
2）待冻存管中液体融化后，立即取出，并用75%酒精纱布擦拭冻存管表面。
3）将冻存管置于生物安全柜中，并将冻存管中的液体转移到含有约9mL完全培养基的离心管中，300g，5min离心，弃上清。
4）用适量的完全培养基重悬细胞并转移到新的培养瓶中，并将细胞置于5% CO2、37℃恒温培养箱静置培养。● 细胞传代
当细胞密度达到 80%以上时，可以进行传代，传代比例 1:2~1:4，2~3 天传代一次。具体操作如下：
1）吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入适量PBS，轻轻晃动润洗细胞，然后将PBS 吸出。
2）加入约1.0 mL 0.25%胰酶，轻轻晃动浸润细胞，然后放在培养箱内消化 2~3 分钟，在显微镜下观察发现细胞变圆，轻轻拍打瓶壁观察到80%细胞从壁上脱落分离时即可加入约5ml完全培养基中和胰蛋白酶。并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落使细胞分散成单细胞悬液。（此处为T75培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3）将终止消化后的细胞悬液转移至干净的15ml离心管中，300g，5min离心，弃上清。
4）用适量的完全培养基重悬细胞，并按照传代比例（推荐传代比例1：2~1：4）转移到新的培养瓶中，并将细胞置于5% CO2、37℃恒温培养箱静置培养。● 细胞冻存
细胞汇合度达到80%-90%时可进行细胞冻存操作。自制冻存液成分：DMEM完全培养基+30%FBS+10%DMSO，为保证冻存细胞较高活力，冻存液最好提前配制并置于4℃冰箱预冷。
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产品类型： 诱导敲低细胞系
| 阳性对照试剂盒（TRAC_gene） | 定制靶基因敲除试剂盒-基础版 | 定制靶基因敲除试剂盒-加强版 | |
| 试剂组成： | |||
| sgRNA引物 | √ | √ | √ |
| PCR引物 | √ | √ | √ |
| 测序引物 | √ | √ | √ |
| 细胞裂解液 | √ | √ | √ |
| cas9蛋白 | √ | × | √ |
| 转染试剂 | √ | × | √ |
| 产品规格 | 3次反应 | 5-10次反应 | 5-10次反应 |
| 交付周期 | 1-2周 | 1-2周 | 1-2周 |
| 交付标准 | 经验证，敲除效率最高可达100%，平均敲除效率90% | 经验证，敲除效率在70%以上(通过对照试剂盒优化细胞转染条件后保障效率) | 经验证，敲除效率在70%以上(通 过对照试剂盒优化细胞转染条件后 保障效率) |
| 价格 | RMB：899 | RMB：1899 | RMB：2699 |
基因敲除试剂盒信息
Gene Symbol
NCBI Gene ID
Ensembl ID
Uniprot ID
规格
物种
储存条件
试剂组成
基因敲除试剂盒说明
产品优势
应用