一叶知秋 | 人永生化角质形成细胞 HaCaT：特性、培养与科研应用全指南
2025-12-22
在皮肤疾病机制研究、皮肤修复材料开发及化妆品安全性评估领域，HaCaT 细胞（人永生化角质形成细胞系） 凭借 “无限增殖、保留角质形成细胞核心功能、培养成本低” 的核心优势，成为替代原代角质形成细胞的理想工具。这款源自正常人皮肤组织的永生化细胞系，既解决了原代细胞传代有限、异质性高的痛点，又因稳定表达角蛋白等分化标志物，成为皮肤研究领域的 “明星模型”。
一、HaCaT 细胞核心档案
1. 基础信息
2. 与原代角质形成细胞的核心差异
二、HaCaT 细胞培养实操（标准化流程）
HaCaT 细胞虽易培养，但需维持角质形成细胞的上皮特性与分化潜能，需严格控制培养基钙浓度、消化条件，避免出现梭形化、分化异常等问题。
1. 必备培养体系
2. 形态鉴别与常见问题解决（附标准图对照）
（1）正常形态特征光学显微镜下：低密度时呈多边形上皮细胞样，胞体清晰，直径 10-15μm，细胞核圆形居中；高密度时呈单层 “铺路石” 排列，无梭形细胞（比例≤5%）。异常形态：若出现胞体皱缩、颗粒增多（代谢异常）或梭形细胞占比＞10%（上皮 - 间质转化），提示细胞特性丢失，需及时复苏早期冻存细胞。
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HaCat 低密度 |
HaCat高密度 |
（2）常见问题与解决方案（避坑指南）
三、HaCat细胞基因编辑难点及解决方案
HaCaT细胞为贴壁上皮细胞，内吞能力弱，常规脂质体转染效率＜20%，且易引发胞内 ROS 积累，导致细胞凋亡；慢病毒递送 Cas9 时，会激活 HaCaT 细胞 TLR3 通路，诱导 IL-6、TNF-α 等炎症因子释放，改变细胞微环境，干扰后续功能实验。粒曼生物优化了HaCaT细胞的转染条件，基于RNP技术，采用电转方法，多克隆的敲除效率可达到90%。以下是粒曼生物HaCaT细胞编辑案例及现货细胞。
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