HiBiT Harbor HEK293 细胞系用于实时蛋白降解监控

2026-06-15

在PROTAC、分子胶水等降解类药物研发，以及蛋白稳定性机制研究中，实时、精准监测靶蛋白降解过程是核心实验需求。传统WB、ELISA等方法操作繁琐，仅能做终点检测，很难捕捉蛋白动态变化。

本次我们使用HiBiT Harbor HEK293定点整合稳定细胞系开展实验，依托成熟的HiBiT生物发光技术，验证其在药物诱导蛋白降解监测中的应用效果。

一、技术简介

HiBiT是仅11个氨基酸的超小型肽标签，与LgBiT亚基结合后可重构荧光素酶并产生生物发光信号。该体系灵敏度高、标签干扰小、定量精准，支持活细胞长时间动态检测。

蛋白降解是改变信号通路活性的一种常见机制。除了通过 RNA 干扰敲低特定蛋白或通过化学方法抑制其分子活性外，通过蛋白水解靶向嵌合体（proteolysis-targeting chimeras，PROTACs）靶向降解蛋白已经成为一种很有前景的药物干预细胞信号的策略，尤其适用于那些缺乏与传统酶抑制剂结合的调节位点或活性位点的蛋白质。

PROTACs是双官能团分子，由与靶蛋白结合的部分和与E3连接酶复合体组分结合的部分偶联而成。各部分同时结合将 E3连接酶复合体带至靶蛋白附近，导致其泛素化和后续蛋白酶体降解。PROTACs dBET1和dBET6设计用于BET家族蛋白靶向蛋白降解，例如溴结构域蛋白4（bromodomain-containing protein 4，BRD4）。通过用 HiBiT 标签标记靶蛋白，可以很容易地监测该过程。