一叶知秋 | BV-2细胞培养要点与基因敲除挑战全解析
2025-04-07
1. 细胞背景
BV2细胞是小鼠小胶质瘤细胞系，因其与原代小胶质细胞的高度相似性，被广泛用于神经炎症、神经退行性疾病（如阿尔茨海默病、帕金森病）及脑肿瘤等领域的研究。小胶质细胞作为中枢神经系统的主要免疫细胞，在炎症调控、神经元保护及病理损伤修复中发挥关键作用。通过基因敲除技术对BV2细胞进行靶向编辑，可精准解析特定基因在神经免疫应答中的功能，为疾病机制研究和药物开发提供关键工具。
2. 细胞描述
- 物种：小鼠
- 组织：脑；胶质瘤
- 细胞形态：半贴半悬，上皮细胞样
- 细胞倍增时间：~24-36 hours
培养条件
- 完全培养基成分：DMEM+10% FBS+1%P/S
- 培养环境：37℃、5%CO2
- 传代比例：1：2~1：3
- 传代频次：2~3 天传代一次
细胞形态图片
图1 BV-2细胞参考正常形态图
BV-2细胞特点
BV2细胞呈半贴壁生长，贴壁部分圆形和多角形细胞同时存在，悬浮生长细胞均呈圆形，贴壁细胞和悬浮细胞比例是不固定的。细胞形态会随着密度的改变发生变化，密度较低时细胞容易出现拉丝、触角较多的情况。随着密度越来越高，圆形细胞会逐渐变多。除非特殊刺激后会分化，常规培养过程中是不会自发分化的。
3. 细胞培养常见问题及处理方法
3.1 细胞完全贴壁且生长缓慢
BV2细胞是半贴壁半悬浮细胞，细胞出现完全呈贴壁状态时，要引起重视，及时调整培养条件。理论上BV-2细胞生长速度很快，类似于人源293细胞，状态好时一天可以倍增一代。如细胞出现生长缓慢的现象需要考虑培养基或污染问题。细胞受到LPS刺激后易分化，分化后的细胞贴壁紧密很难消化，且大部分是长梭形，有明显触角。此时需考察血清的内毒素含量，同时需观察培养基污染情况，若含有细菌或真菌污染，也会刺激细胞分化导致生长缓慢。
应对措施：如果判定为污染，应及时处理掉污染细胞，重新引种。回溯培养过程，如果发现是血清更换，或培养条件变化导致的问题，可以通过短时消化的方式，筛选掉贴壁牢固的非正常部分细胞，仅收集正常状态的BV-2进行培养。具体操作：轻轻吹打下培养瓶底部贴壁不牢的细胞，和悬浮细胞一起收集下来。低转速离心去掉细胞碎片及死细胞后再转移入新培养瓶中继续培养。
图2 贴壁细胞形态改变示例
3.2 细胞完全悬浮不贴壁
Bv-2对培养基酸碱度比较敏感。PH偏碱时候，培养基呈紫红色。在偏碱培养基中培养数小时后细胞将会全部飘起。这种非正常状态如果维持的时间过长，会导致细胞死亡，如果及时传代换液，细胞可很快恢复。由于bv-2生长速度快，1：3传代后，48h后就需要换液，否则细胞密度过大，营养成分减少，容易出现大量细胞漂浮的情况，及时换液即可。
4. BV-2细胞基因敲除应用
BV2细胞是小鼠小胶质瘤细胞系，因其与原代小胶质细胞的高度相似性，被广泛用于神经炎症、神经退行性疾病（如阿尔茨海默病、帕金森病）及脑肿瘤等领域的研究。小胶质细胞作为中枢神经系统的主要免疫细胞，在炎症调控、神经元保护及病理损伤修复中发挥关键作用。通过基因敲除技术对BV2细胞进行靶向编辑，可精准解析特定基因在神经免疫应答中的功能，为疾病机制研究和药物开发提供关键工具。
阿尔茨海默病（AD）机制研究，在AD模型中，BV2细胞经Aβ蛋白刺激后，通过敲除TREM2基因，发现其调控小胶质细胞从促炎M1型向抗炎M2型极化，显著降低IL-6、TNF-α等炎症因子水平，并增强Aβ清除能力。例如，蛇床子素通过调控APOE-TREM2通路减轻BV2细胞的炎症损伤，为中药抗AD研究提供了新思路。
神经保护与氧化应激调控，敲除S100A9基因的BV2细胞在脂多糖（LPS）诱导的炎症模型中，线粒体损伤和氧化应激水平显著降低，提示该基因在败血症相关神经损伤中的关键作用。
药物靶点筛选与验证，基因敲除BV2细胞可用于高通量筛选抗炎药物。例如，通过敲除特定信号通路基因（如NF-κB），评估药物对炎症级联反应的抑制效果。。
5. 粒曼BV-2细胞基因敲除示例
2025 /
04-07
所属分类：
公司新闻
相关资讯—
2025-12-15
2025-12-08
2025-12-08