一叶知秋 | 胃癌细胞HGC-27基因编辑细胞系
2025-05-26
1.细胞背景
我们上一篇一叶知秋详述了AGS（人胃腺癌细胞）的培养方法及基因编辑细胞系。本期分享另外一株科研常用的胃癌细胞HGC-27。
AGS 是高分化胃腺癌，保留腺腔结构，适合药物敏感性研究；HGC-27是未分化胃癌，低黏附性，主要应用于侵袭转移机制研究。研究显示，HGC-27的淋巴结转移率模拟度是AGS细胞的3倍。二者的核心差异比对表：
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特性指标 |
AGS |
HGC-27 |
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细胞来源 |
54岁的白人女性胃腺癌患者的胃组织 |
男性胃癌患者的转移性淋巴结灶 |
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分化程度 |
高分化（胃腺癌特征明显） |
未分化（更恶性） |
|
形态 |
铺路石样贴壁生长 |
多边形，成团 |
|
应用 |
药物筛选/凋亡研究 |
侵袭转移机制研究 |
|
热门靶点 |
HER2,P53 |
MMP2,Vimentin |
2.细胞描述
物种：人
组织：胃
细胞形态：贴壁细胞，上皮细胞样
细胞倍增时间：~16-24 hours
培养条件
培养环境：37℃、5%CO2
传代比例：1：4~1：5
传代频次：2~3 天传代一次
细胞特点：
HGC-27细胞它在体外呈上皮样贴壁生长，呈多角形或短梭形，以单层形式生长。细胞生长速度快，汇合度达到70%-80%左右可传代（类似于下图36h密度）。
图2 HGC-27细胞生长图
3.AGS与HGC-27细胞特性及操作要点对比
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操作步骤 |
AGS |
HGC-27 |
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消化时间 |
1%胰酶-EDTA消化1-2分钟 |
1%胰酶-EDTA消化30秒 |
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传代频率 |
1:3~1:4传代， 2-3天传代一次 |
1:4~1:5传代， 2-3天传代一次 |
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吹打力道 |
中等力道 |
团块难吹散，需轻柔多次吹打 |
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注意事项 |
细胞生长速度快，注意传代密度 |
细胞生长速度快，注意传代密度 |
4.粒曼HGC-27基因编辑细胞
HGC-27细胞作为未分化胃癌模型，其基因敲除细胞在胃癌基础研究中有不可替代性，高转移、低黏附性、耐药性强等特点可用于模拟晚期胃癌扩散、适合侵袭迁移研究、精准筛选肿瘤治疗靶点。最近和不少读者交流，对于HGC-27细胞的转染过程存在很大难点，用PEI转染试剂的效率在20%左右，对于细胞的编辑难度较大，粒曼生物做了大量的细胞培养及转染条件优化，采用电穿孔的方法，多克隆编辑效率能达到100%。很大的提高了单克隆分选的成功率。
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序号 |
类型 |
细胞名称 |
基因名称 |
实验方法 |
多克隆阳性率 |
单克隆阳性率 |
|
1 |
KO |
HGC-27 |
RNP |
100% |
100% |
|
|
2 |
KO |
HGC-27 |
LMBR1L |
RNP |
100% |
100% |
|
3 |
OE |
HGC-27 |
GFP |
RNP |
80% |
100% |
HGC-27敲除SIVA1基因稳转细胞系验证数据：-37bp
HGC-27_KO_SIVA1-/GFP+细胞的 GFP荧光表达流式分析结果示例：
2025 /
05-26
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